在血清中基于Gábor转换的抗体量化:一个实验室间的液体染色学/高分辨率质谱仪调查

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 分析化学 分析化学
• 药理学 药理学是指药理学的学科.

背景情况:

• 治疗性单克隆抗体 (t-mAbs) 对于治疗癌症和自身免疫性疾病至关重要.
• 目前的量化方法 (LBA,LC-MS/MS) 往往缺乏所需的灵敏度和特异性.
• 高分辨率质谱 (HRMS) 提供了更好的蛋白质形态量化.

研究的目的:

• 评估基于新型加博变换 (GT) 的iFAMS Quant+软件用于治疗单克隆抗体 (t-mAb) 量化.
• 将iFAMS Quant+的性能与经过验证的实验室开发测试 (LDT) 进行比较.
• 评估HRMS在t-mAb分析的上下和中间方法中的实用性.

主要方法:

• 使用iFAMS Quant+软件与Agilent 6545XT AdvanceBio Q-TOF用于在大约400个血清样本中的t-mAb (vedolizumab) 量化.
• 结果与梅奥诊所的Thermo Q Exactive Plus Orbitrap LDT相比,使用常规提取离子染色图 (XIC).
• 在iFAMS Quant+工作流中使用基于GT的电荷状态解卷,背景减去和信号集成.

主要成果:

• 通过对351个受试者样本的校准,质量控制和Passing-Bablok回归分析,iFAMS Quant+和LDT之间表现出了良好的协议.
• 在iFAMS Quant+工作流中,成功量化了治疗性单克隆抗体vedolizumab.
• 确定了iFAMS Quant+解卷方法的独特优势,用于表征干扰物和分析信号异常.

结论:

• 基于加博转换 (GT) 的iFAMS Quant+软件提供了治疗单克隆抗体 (t-mAbs) 的准确可靠量化.
• 这种基于HRMS的方法为现有方法提供了可行的替代方案,并增强了数据解释的能力.
• 基于解卷的iFAMS Quant+工作流对于复杂的生物矩阵和在t-mAb分析中识别潜在干扰是有利的.