生物化人性化抗可卡因mAb的可溶性降低和吸附性增加
Terence L Kirley1, Andrew B Norman1
1Department of Pharmacology, Physiology, and Neurobiology, College of Medicine, University of Cincinnati, 231 Albert Sabin Way, Cincinnati, OH, 45267-0575, USA.
优化抗体的生物化是至关重要的. 对于抗可卡因单克隆抗体 (mAbs),每mAb大约3个生物素分子的标签比维持了溶解性,稳定性和抗原结合,防止了标签水平更高时出现的问题.
科学领域:
- 生物化学 生化学
- 蛋白质修饰是一种蛋白质修饰.
- 抗体工程 抗体工程
背景情况:
- 生物化是生物化学试验的关键蛋白质修饰.
- 对抗药物抗体 (ADA) 测试对于检测对治疗性蛋白质的抗体至关重要.
- 鉴定修饰的抗体,如生物化抗可卡因mAb,对于药物开发至关重要.
研究的目的:
- 评估不同生物化水平对抗可卡因单克隆抗体 (mAb) 的影响.
- 为了确定维持抗体完整性和功能的最佳生物素与mAb的比率.
- 在抗体表征中识别与过度生物素标记相关的潜在问题.
主要方法:
- 生物化抗可卡因mAb在不同的固化度.
- 评估mAb的溶解度和表面结合.
- 原生凝阿加罗斯电泳,差异扫描度测量和异热定位热量测量.
- 对抗原结合亲和力和抗体稳定性的评估.
主要成果:
- 较高的生物化水平 (>3生物/mAb) 显著降低了mAb的溶解度和增加了表面吸附.
- 标记3生物/mAb以上的固态度导致mAb结构和稳定性的明显变化,通过生物物理方法证实了这一点.
- 大约3个生物/mAb的生物化比保持了mAb的溶解性,稳定性和可卡因结合亲和力.
结论:
- 生物化程度极大地影响了抗体特性.
- 建议对抗可卡因mAb进行大约3个生物/mAb的生物化固体测量,以保持其结构完整性,溶解性和功能活性.
- 这些发现与其他生物化抗体的开发和表征有关.
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