在CHO细胞中优化一种用于重组蛋白质生产的新型表达系统
Junhe Zhang1,2,3, Chenyang Du4,5, Yue Pan6
1Institutes of Health Central Plains, Xinxiang Key Laboratory for Tumor Drug Screening and Targeted Therapy, Xinxiang Medical University, Xinxiang, 453003, China. zjh@xxmu.edu.cn.
Scientific reports
|October 22, 2024
概括
优化带有调节元件的载体,并在中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞中淘汰亡基因,显著提高了重组蛋白质的产生. 这种新的CHO细胞表达系统增强了大规模的蛋白质制造.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分子生物学分子生物学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞被广泛用于重组蛋白质表达.
- 在CHO细胞中,当前的表达水平通常是有限的,需要在矢量设计和细胞系工程方面进行改进.
研究的目的:
- 为了增强CHO细胞中的重组蛋白表达.
- 通过矢量优化和基因编辑开发一个改进的CHO细胞表达系统.
主要方法:
- 通过将Kozak和Leader监管元素纳入目标基因的上游,进行载体优化.
- 使用CRISPR/Cas9技术,在CHO细胞中淘汰了apoptotic基因Apaf1.
- 评估了重组蛋白质的暂时和稳定表达水平.
主要成果:
- 与对照组相比,添加Kozak和Leader元素显著增加了标蛋白的表达.
- 绝杀apoptotic基因Apaf1也导致了复合蛋白质生产的增加.
- 矢量优化和Apaf1淘汰的结合策略导致了一种新的CHO细胞表达系统,显著改善了蛋白质产量.
结论:
- 用特定的调节元件进行矢量优化,可以有效地增强重组蛋白质表达.
- 抑制亡途径,特别是通过向Apaf1,是一种可行的策略,可以增加CHO细胞中的蛋白质生产.
- 开发的CHO细胞表达系统为大规模重组蛋白制造提供了一个有前途的基础.
