充分利用1.0毫米识别器的潜力 在基于UHPLC-HRMS的非向代谢学列中
Danila La Gioia1,2, Emanuela Salviati1, Manuela Giovanna Basilicata3
1Department of Pharmacy, University of Salerno, Via Giovanni Paolo II, 84084, Fisciano, SA, Italy.
Analytical and bioanalytical chemistry
|October 23, 2024
概括
一个1.0毫米的微孔柱设置显著提高了使用UHPLC-HRMS在非目标代谢学中的灵敏度和特征检测. 这种方法可以改善各种样本类型的低度代谢物分析和数据质量.
科学领域:
- 分析化学 分析化学
- 代谢学 代谢学 代谢学
- 质谱测量质量谱测量
背景情况:
- 使用超高性能液态染色学-高分辨率质谱学 (UHPLC-HRMS) 的非目标代谢学通常使用2.1毫米内径 (i.d.) 这是柱子. 柱子.
- 挑战包括分析代谢组的广泛度范围和有限的样本量.
- 减少柱子直径被探索为解决方案,以提高分析性能.
研究的目的:
- 为了评估1.0毫米的IDD的性能. 微孔UHPLC-HRMS设置与标准的2.1mm i.d.相比. 系统用于非目标代谢学.
- 在各种样本类型和分析模式中评估灵敏度,检测极限 (LOD),量化极限 (LOQ),可重复性和特征检测.
主要方法:
- 对比1.0毫米的I.D. 微孔和2.1毫米的I.D. 微型UHPLC和标准UHPLC系统上的标准钻孔柱,分别与四极轨道 HRMS 合.
- 对极性标准代谢物,血,干血斑 (DBS) 和结直肠癌患者衍生器官 (PDO) 的分析.
- 使用了逆相 (RP) 和水友交互液态染色学 (HILIC) 模式,以及完全扫描数据依赖采集 (FS-DDA).
主要成果:
- 在1.0毫米的ID.D. 这种设置显示了平均3.8倍的灵敏度增长,与2.1mm i.d.相比,平均LOD (1.48 ng/mL vs. 6.18 ng/mL) 和LOQ (4.94 ng/mL vs. 20.60 ng/mL) 显着较低. 一个设置.设置.设置.
- 使用微孔方法检测和量化了所有代谢物在量化的下限 (LLOQ),在保留时间 (0.29% vs. 0.63%) 和峰值区域 (4.65% vs. 7.27%) 的较低变化系数 (CV%) 中显示出更好的重复性.
- 在各种样本类型和模式中,观察到的MS1特征 (38.95%),MS2特征 (39.26%) 和MS/MS光谱匹配 (18.23%) 的显著增加.
结论:
- 在1.0毫米的ID.D. UHPLC-HRMS配置为增强分析覆盖率提供了一个可行的策略,特别是对于数量有限的样品.
- 这种微孔方法保持了与标准的2.1mm i.d.相比的分析吞吐量和稳定性. 在减少溶剂消耗的同时,格式化.
- 这些发现支持采用1.0毫米的IDD. 列为改善非目标代谢表现的列.
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