为同时诊断肠道寄生虫,优化18 S rRNA元编码
Dongjun Kang1, Jun Ho Choi1, Myungjun Kim1
1Department of Tropical Medicine, Institute of Tropical Medicine, Yonsei University College of Medicine, Seoul, 03722, Republic of Korea.
Scientific reports
|October 24, 2024
概括
下一代测序成功检测出所有11种肠道寄生虫物种使用18S rDNA V9区域. 诸如DNA二次结构和PCR回火温度等因素影响了寄生虫读数,影响了检测准确度.
科学领域:
- 医学寄生虫学 医学寄生虫学
- 分子生物学分子生物学
- 基因组学就是基因组学.
背景情况:
- 下一代测序 (NGS) 为同时检测多种寄生虫物种提供了先进的工具.
- 18S核糖体DNA (rDNA) V9区域是一个保存的标记物,适合寄生虫识别.
研究的目的:
- 评估安普利康下一代测序 (NGS) 检测11种肠道寄生虫的有效性.
- 使用NGS调查影响寄生虫DNA准确量化因素.
主要方法:
- 从11种肠道寄生虫中克隆18SrDNAV9区域,并将其转化为等离子体.
- 在Illumina iSeq 100平台上汇集等等量等离子体并执行放大NGS.
- 分析读数,并将其与DNA二次结构和PCR条件相关联.
主要成果:
- 检测到所有11个向寄生虫物种,共产生434,849次阅读.
- 在物种之间观察到读数的显著差异,Clonorchis sinensis和Entamoeba histolytica的比例最高.
- 在DNA二次结构稳定性和输出读数之间发现了负相关性;PCR回火温度也影响了相对丰度.
结论:
- 针对18SrDNA V9区域的Amplicon NGS是一种可行的方法,可以同时检测多种肠道寄生虫.
- 了解DNA二次结构和PCR参数的影响对于优化寄生虫检测和量化至关重要.
- 这些发现有助于改善肠道寄生虫感染的诊断工具,有助于控制和预防工作.


