开发一种哺乳动物细胞系,稳定生产抗PD-1的细胞系

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 免疫学 免疫学 免疫学
• 在瘤学瘤学.

背景情况:

• 免疫检查点封锁,针对编程细胞死亡1 (PD-1),是癌症免疫治疗的关键策略.
• 瘤通过利用PD-1/PD-L1/PD-L2相互作用来逃避免疫反应.
• 像Nivolumab这样的单克隆抗体可以通过阻止这种相互作用来恢复抗瘤免疫力.

研究的目的:

• 建立一个稳定的中国汉姆斯特卵巢 (CHO) DG44细胞表达系统,用于基于Nivolumab的抗PD-1抗体.
• 评估两种不同的表达向量系统 (pOptiVEC和pcDNA3.3) 用不同的信号序列来产生抗体.

主要方法:

• 将Nivolumab重链和轻链克隆成pOptiVEC和pcDNA3.3矢量,每个矢量都有两个信号序列.
• 在CHO DG44细胞中共传染八种得到的重组等离子体,以评估稳定表达.
• 优化生产条件以提高抗体产量.

主要成果:

• 无论是pOptiVEC还是pcDNA3.3载体,都促进了抗PD-1抗体在CHO DG44细胞中的稳定整合和表达.
• 信号序列的选择极大地影响了产生抗体的数量.
• 优化生产条件导致抗体产量增加,证明了可扩展性的潜力.

结论:

• 在CHO DG44细胞中,pOptiVEC和pcDNA3.3表达系统对基于Nivolumab的稳定抗PD-1产生有效.
• 信号序列是抗体表达水平的关键决定因素.
• 进一步优化可以提高未来癌症免疫治疗应用的产量.