通过使用2A自粘性基表达系统,在Pichia pastoris中增强特定向的抗菌K的表达
Yunhui Zhu1, Yuwen Li1, Yuxin Fang1
1Laboratory of Molecular Nutrition and Immunity, College of Animal Science and Technology, Northeast Agricultural University, Harbin 150038, China.
Antibiotics (Basel, Switzerland)
|October 25, 2024
概括
这项研究使用Pichia pastoris.成功地产生了针对大肠杆菌的向抗微生物 (STAMP). 优化的发酵过程显著增加了产量,并证明了的存在.
科学领域:
- 微生物学和生物技术
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 多药耐药细菌的增加构成了全球健康的重大威胁.
- 抗微生物 (AMP) 显示出对抗耐药菌株的承诺,特别向的AMP (STAMP) 保护宿主微生物群.
- 酸K,一种对大肠杆菌有效的STAMP,此前已被确定.
研究的目的:
- 开发一种有效的生产方法,用于STAMP酸K使用甲基营养酵母Pichia pastoris.
- 研究遗传结构设计 (单个与2A序列的重复) 对产量的影响.
- 优化发酵条件以最大限度地提高K产量.
主要方法:
- 在Pichia pastoris中设计了三种表达结构:酸K (K),酸K与2A序列 (KTK) 的并联副本,以及KTAK.
- 评估了从每个结构中产生的K的产量和特性.
- 针对最有效构造 (KTK) 的优化发酵参数.
主要成果:
- KTK构造的收益率是K构造的两倍以上,突出显示了2A序列的好处.
- 经过优化发酵,KTK的产量达到6.67mg/ml.
- 发酵的K表现出与化学合成的具有可比的选择性,抗菌活性,生物相容性和稳定性.
- 作用机制包括膜透和反应性氧物种 (ROS) 诱导.
结论:
- 皮奇亚牧草的表达系统提供了一种高效的方法,用于生产高产的STAMPK.
- 该研究为大规模制造和AMP的更广泛应用奠定了基础.
- 这种方法提供了一种新的策略,可以提高微生物系统中的抗微生物产量.
