使用qPCR和ddPCR研究细胞治疗产品的生物分布:一个多站点评估
Eriko Fujita1, Syunsuke Yamamoto2, Takeshi Hanada3
1Applied Research & Operations, Astellas Pharma Inc., Tsukuba-shi, Ibaraki, Japan.
Cytotherapy
|October 25, 2024
概括
标准化细胞疗法生物分布试验对于预测疗效和安全至关重要. 这项研究验证了定量聚合酶连锁反应 (qPCR) 和滴滴数码PCR (ddPCR) 方法,在小鼠中对人类介质干细胞跟踪的设施中显示一致的结果.
科学领域:
- 再生医学是一种再生医学.
- 细胞疗法细胞疗法
- 药理动力学 药理动力学
背景情况:
- 细胞疗法产品 (CTPs) 需要强大的生物分布 (BD) 评估以获得临床转化.
- 目前评估CTP BD的方法缺乏国际标准化.
- 标准化BD测试对于预测CTP的有效性和安全性至关重要.
研究的目的:
- 为细胞治疗产品标准化生物分布测定方法.
- 为了验证CTP BD评估的定量聚合酶连锁反应 (qPCR) 和滴滴数字PCR (ddPCR).
- 在免疫缺陷小鼠中评估人间介质干细胞 (hMSC) 的体内生物分布.
主要方法:
- 在体外验证使用灵长类动物特异性Alu基因进行qPCR和ddPCR.
- 在小鼠组织中准备和分析具有已知人类细胞数量的质量控制样本.
- 在体内生物分布研究涉及向免疫缺陷小鼠静脉注射hMSCs,在1,4和24小时后收集组织.
主要成果:
- 两种qPCR和ddPCR方法都显示了可接受的准确性 (在±50%) 和精度 (CV<50%).
- 在参与研究的设施之间没有观察到显著的量化差异.
- 在各个设施中发现了一致的hMSC生物分布特征,肺部表现出最高的细胞分布.
结论:
- 使用qPCR和ddPCR与Alu序列的定量评估可适应细胞治疗产品生物分布评估.
- 标准化方法为非临床生物分布研究提供了可靠的方法.
- 这种标准化有助于预测基于细胞的再生疗法的临床疗效和安全性.
