开发一种多重PCR检测方法,用于检测核桃中的Neofusicoccum parvum和Botryosphaeria dothidea

科学领域:

• 植物病理学 植物病理学
• 分子生物学分子生物学
• 农业科学 农业科学

背景情况:

• 包括Neofusicoccum parvum和Botryosphaeria dothidea在内的Botryosphaeriaceae真菌是核桃园中癌症和衰退的重要病原体.
• 这些疾病表现为水果腐烂,树枝和树枝癌症,并可能导致树木死亡,影响作物产量和健康.

研究的目的:

• 开发一种灵敏,快速,特定和内部控制的多重PCR试验,用于检测核桃树上的Neofusicoccum parvum和Botryosphaeria dothidea.
• 通过使用各种真菌分离物和植物相关物种,验证开发的PCR试验的包容性和排他性.
• 评估多重PCR试验对检测这些病原体直接在核桃植物材料中的适用性.

主要方法:

• 开发一种多重PCR测定方法,其中包含一种内部抑制控制 (大肠杆菌DNA).
• 验证测试的特异性,使用每种标真菌物种的11个分离物和20种非标树相关的真菌物种.
• 在无症状和症状的核桃和树枝样本上测试测试的性能.

主要成果:

• 多重PCR测定表明Neofusicoccum parvum和Botryosphaeria dothidea的高包容性以及对其他真菌物种的高排他性.
• 该试验成功地检测出了在有症状的核桃组织中的向病原体,放大水平与真菌污染相关.
• 无症状的树皮或树枝样本没有得到放大,这表明测试对受感染的植物材料的特异性.

结论:

• 开发了一种快速可靠的多重PCR诊断工具,用于同时检测影响核桃树的两个关键真菌病原体.
• 该试验具有敏感性,特异性,并包括内部控制,使其适合准确诊断疾病.
• 该协议虽然针对核桃和树枝进行了优化,但对于在各种植物样本中检测这些病原体具有潜在的适用性.