在Pichia pastoris中,高效的酸酶表达得到了维特里斯基拉血红蛋白的促进
Ziqiang Gu1, Feiyu Niu1, Zihan Yu1
1College of Food Science and Engineering, Ocean University of China, No. 1299 Sansha Road, Qingdao 266003, China.
International journal of biological macromolecules
|October 31, 2024
概括
玻璃血红蛋白 (VHb) 通过改善呼吸和减轻在低氧情况下的AOX抑制来增强Pichia pastoris中异质蛋白表达. 这增加了酶活性,为高密度发酵提供了基础.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分子生物学分子生物学
- 代谢工程是代谢工程.
背景情况:
- 已知玻璃血红蛋白 (VHb) 在低氧环境中改善异质蛋白表达.
- 在Pichia pastoris表达系统中的VHb作用的精确机制需要进一步阐明.
研究的目的:
- 研究VHb增强Pichia pastoris中异质蛋白表达的机制.
- 优化VHb构建策略以提高蛋白质产量.
主要方法:
- 设计和实施三个不同的VHb建设策略.
- 在P. pastoris中,102C300C和Vgb基因的同时表达.
- 酶活性测定,光标记,转录组和代谢组分析.
主要成果:
- 序列基因表达 (102C300C跟着Vgb) 在X33-102C300C-Vgb菌株中显著增加了20.7%的酶活性.
- 双转录单元方法显示出优越的VHb表达.
- 通过在低氧条件下增强呼吸,VHb改善了酵母生长,减轻了AOX抑制,增加了酸酶活性.
结论:
- 通过改善呼吸和AOX调节,VHb显著增强了P. pastoris中的酸酶活性.
- 双转录单元策略对于VHb表达是有效的.
- 这些发现为优化P. pastoris高密度发酵中的重组蛋白质生产提供了理论基础.
