在C. elegans,小鼠和人类全血中检测NAD⁺/NADH的基于发光的协议

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 分子生物学分子生物学
• 代谢学 代谢学 代谢学

背景情况:

• 尼古丁胺胺氨基二核酸 (NAD+) 和其减少形式 (NADH) 是参与许多代谢过程的关键辅酶.
• NAD+/NADH比率的失调与各种疾病和衰老有关.
• 准确量化NAD+和NADH水平对于了解细胞代谢和疾病机制至关重要.

研究的目的:

• 开发和验证用于检测NAD+,NADH和NAD+/NADH比率的强有力的测试方法.
• 建立适用于各种生物样本和模型的标准化协议.
• 促进对代谢途径和与年龄有关的变化的研究.

主要方法:

• 采样采集和准备方案,用于Caenorhabditis elegans,小鼠肌肉组织,小鼠全血和人类全血.
• 使用微板阅读器对NAD+和NADH水平的酶检测.
• 根据测量的度计算NAD+/NADH比率.

主要成果:

• 该试验在所有测试的生物模型中证明了NAD+和NADH的可靠量化.
• 已建立的样本处理协议确保了NAD+和NADH测量的完整性.
• 可以准确地确定NAD+/NADH比率,提供对新陈代谢状态的见解.

结论:

• 提出的NAD+/NADH检测试验是代谢研究的一种多功能和可靠的工具.
• 该协议可使在各种细胞和组织类型中一致量化NAD+和NADH水平.
• 该试验支持进一步调查NAD+代谢在不同生物体的健康和疾病中的作用.