高纯度麻疹病毒由盐活性核酶处理和氨酸亲和染色学处理的组合产生的
Viktoria Mayer1, Florian Steiner2, Alois Jungbauer1
1Austrian Centre of Industrial Biotechnology, Vienna, Austria; Institute of Bioprocess Science and Engineering (IBSE), BOKU University, Vienna, Austria.
Journal of chromatography. A
|November 2, 2024
概括
这项研究开发了一种有效的方法,用于使用氨酸亲和染色学净化麻疹病毒. 将M-SAN内核酶治疗与CaptoTM肝素结合起来,显著提高了疫苗和癌症治疗应用中的病毒纯度和产量.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 病毒学 病毒学
- 下游加工 下游加工
背景情况:
- 高纯度的病毒制剂对于准确的疗效确定至关重要.
- 敏感的包裹病毒,如麻疹病毒,需要简单有效的净化方法.
- 在包裹病毒制剂中,DNA污染是关键的杂质.
研究的目的:
- 为了评估氨酸和氨酸类亲和色谱用于重组麻疹病毒净化.
- 调查内核酶治疗对DNA去除和病毒恢复的影响.
- 为麻疹病毒制造开发可扩展的净化工艺.
主要方法:
- 使用CaptoTM DeVirS (类似氨酸) 和CaptoTM 氨酸亲和染色法,净化麻疹病毒.
- 在染色学之前整合内核酶 (Benzonase®或M-SAN) 治疗.
- 病毒恢复,纯度和DNA污染水平的评估.
主要成果:
- 卡普托TM 氨酸实现了高达85%的麻疹病毒恢复,超过了卡普托TM DeVirS (8%的恢复).
- 将M-SAN与CaptoTM肝素结合使用,恢复率为62%,DNA污染率显著降低 (10.2 ng dsDNA/剂量).
- 与没有内核酶的过程相比,内核酶处理大大提高了纯度.
结论:
- 肝素亲和色谱,特别是用CaptoTM肝素和M-SAN,是有效的净化敏感的麻疹病毒.
- 开发的方法简单,可扩展,适合下游制造工艺.
- 这种方法提高了麻疹病毒的纯度,这对于疫苗和癌症治疗应用至关重要.
