在大米中使用SpCas12f进行农细菌介导的转化和向突变
Satoru Sukegawa1, Seiichi Toki1,2,3,4, Hiroaki Saika5
1Institute of Agrobiological Sciences, National Agriculture and Food Research Organization, Tsukuba, Ibaraki, Japan.
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
|November 5, 2024
概括
我们介绍了使用紧的CRISPR-Cas12f系统在大米中进行向突变发生的协议. 这种微型的CRISPR-Cas12f基因编辑工具为植物的载体构造和转化效率提供了优势.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 遗传学 是一个遗传学.
- 植物科学 植物科学
背景情况:
- 集群定期间隔的短平行体重复 (CRISPR) -Cas是一种转基因生物适应性免疫系统,用于基因组编辑.
- 克里斯普尔-Cas9被广泛使用,但它的尺寸可能会限制某些应用.
- CRISPR-Cas12f是一种较小的替代方案,为矢量构造和转换效率提供了潜在的好处.
研究的目的:
- 描述使用Syntrophomonas palmitatica Cas12f (SpCas12f) 在大米中的向突变发生的协议.
- 突出使用紧的CRISPR-Cas12f系统用于植物基因组编辑的优点.
- 要总结增强SpCas12f介导向突变发生率的方法.
主要方法:
- 米的农细菌介导的转化.
- 使用Syntrophomonas palmitatica Cas12f (SpCas12f) 的有针对性的突变发生.
- 优化策略,以提高突变发生效率.
主要成果:
- 成功实施了一项用于大米中SpCas12f介导的向突变发生的协议.
- 展示了紧的CRISPR-Cas12f对植物基因组工程的有用性.
- 确定增加向突变频率的方法.
结论:
- 紧的SpCas12f系统是一种可行的和有利的工具,用于在米中进行基因组编辑.
- 该协议促进了植物有效的向突变发生.
- 进一步的优化策略可以增强CRISPR-Cas12f在植物生物技术中的应用.
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