从使用不同方法脱细胞化的猪器官中获得的细胞外矩阵的表征

科学领域:

• 再生医学是一种再生医学.
• 生物材料科学 生物材料科学
• 组织工程是组织工程.

背景情况:

• 再生医学旨在创造组织和器官,可能解决器官移植短缺问题.
• 细胞外基质 (ECM) 是至关重要的,为细胞生长和分化提供支架和生化信号.
• ECM的组成包括纤维蛋白和蛋白质甘氨酸,为细胞过程提供了一个动态的微环境.

研究的目的:

• 使用四种不同的脱细胞化技术,从猪器官中提取的细胞外基质 (ECM) 进行表征.
• 评估脱细胞化方法对ECM超结构,组成和剩余细胞材料的影响.
• 建立一个多模式的方法来评估再生医学ECM质量.

主要方法:

• 猪器官的脱细胞化使用四种不同的方法.
• 组织学分析 (血素和乙素) 来评估细胞去除和ECM完整性.
• 生物化学试验包括DNA量化,蛋白质含量比辛酸 (BCA) 试验.
• 质谱学和蛋白质组分析,以详细检测蛋白质成分.
• 极化显微镜检查原纤维的方向.

主要成果:

• 组织学证实,ECM中没有核,并且存在糖氨酸甘油 (GAG) 和原.
• 原生胰腺表现为亡,影响了ECM质量,dSDNA含量减少.
• 质谱测量证实了基于脱细胞化技术的蛋白质组成 (多达2700种蛋白质) 的显著差异.
• 在ECM中残留的双链DNA (dsDNA) 含量低于原生器官中的含量.
• BCA测定表明不同器官和技术的蛋白质含量不同.
• 极化显微镜显示了原纤维方向的差异.

结论:

• 脱细胞化技术显著影响得到的ECM的蛋白质组成和结构完整性.
• 多模式表征方法对于理解来自不同脱细胞化方法的ECM特性至关重要.
• 优化脱细胞化是平衡细胞成分去除与保存ECM超结构和复原应用的成分的关键.