铁合因子的合成由热友的基酶没有脚手架NifENEN的合成
Lucía Payá-Tormo1,2, Carlos Echavarri-Erasun1,2, Natalia Makarovsky-Saavedra1,2
1Centro de Biotecnología y Genómica de Plantas, Universidad Politécnica de Madrid e Instituto Nacional de Investigación y Tecnología Agraria y Alimentaria/Consejo Superior de Investigaciones Científicas, Madrid 28223, Spain.
在一些细菌中,酶激活可以在没有NifEN蛋白的情况下发生. 这项研究揭示了一种使用NifH,NifB和apo-NifDK蛋白质进行Mo-nitrogenase成熟的新途径.
科学领域:
- 生物化学 生化学
- 微生物学 微生物学
- 固定的方法是固定.
背景情况:
- 酸酶FeMo-辅因子 (FeMo-co) 成熟通常需要NifB和NifEN成熟酶复合体.
- 一些半菌,如Roseiflexus sp. 这种植物. RS-1,缺乏尼芬,这表明了其他成熟途径.
研究的目的:
- 研究一种NifEN-独立的路径,用于Roseiflexus sp.中的Mo-nitrogenase成熟. 在RS-1中使用RS-1.
- 为了确定Roseiflexus NifH,NifB和apo-NifDK蛋白是否可以重构活性酶.
主要方法:
- 在大肠杆菌中,Roseiflexus NifH,NifB和apo-NifDK蛋白的表达.
- 使用表达蛋白和必要的基质 (同位素,酸盐,SAM) 的体外复制试验.
- 酶活性测定测量N2,质子和乙烯还原.
主要成果:
- 对于FeMo-co成熟和酶激活,Roseiflexus NifH,NifB和apo-NifDK蛋白质是足够的.
- 大肠杆菌表达的apo-NifDK含有P集群,但缺乏FeMo-co,表明FeMo-co插入成功.
- 复制的化酶表现出与阿佐托巴克特化酶相似的N2,质子和乙烯降解比率.
结论:
- 有一种新的NiFEN-独立的Mo-基酶激活通路存在,利用NifH,NifB和apo-NifDK.
- 这一发现扩大了我们对各种细菌中固化机制的理解.
- 这项研究证明了不同物种中关键的酶生物合成蛋白的功能互换性.
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