分析剂和探针化温度指导的混合化方法开发策略LC-MS/MS siRNAs的定量化
Zifeng Song1, Angela Lu1, Long Yuan1
1Drug Metabolism and Pharmacokinetics, Biogen, 225 Binney St, Cambridge, MA 02142, USA.
Journal of pharmaceutical and biomedical analysis
|November 6, 2024
概括
为小干扰RNA (siRNA) 疗法开发准确的量化方法至关重要. 这项研究提出了一种新的化温度导向策略,用于快速可靠的杂交LC-MS/MS测试,用于siRNA生物分析.
科学领域:
- 药理学 药理学是指药理学的学科.
- 分析化学 分析化学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 小干扰RNA (siRNA) 代表了一类快速发展的寡核酸治疗药物.
- 在生物矩阵中精确量化siRNA对于药理动力学,毒理动力学和生物分布研究至关重要.
- 现有的杂交LC-MS/MS方法对于双链siRNA生物分析是有限的,因为对测试开发原则的理解不佳.
研究的目的:
- 系统地评估用于siRNA的混合化LC-MS/MS测定开发的关键参数.
- 建立一个可靠的siRNA生物分析的实用和有效的战略.
- 证明开发的双链寡核酸策略的适用性.
主要方法:
- 对五种不同的探头类型进行混合化LC-MS/MS的比较评估.
- 优化混合,化和柱体温度的优化.
- 开发一种以化温度 (Tm) 为指导的测试开发策略.
- 该策略在小鼠血中应用于已批准的siRNA药物帕蒂西兰.
主要成果:
- 为siRNA开发快速可靠的杂交LC-MS/MS测定方法,开发了一个Tm引导的策略.
- 该方法在小鼠血中成功量化了siRNA-A,其范围为1.00-1000 ng/mL.
- 开发的方法已被用于支持多个临床前小鼠研究.
结论:
- 以TM为指导的策略为siRNA和其他双链寡核酸的混合化LC-MS/MS分析开发提供了通用和有价值的方法.
- 这一策略促进了精确和敏感的生物分析,这对于寡核酸治疗开发至关重要.
- 这些发现有助于推进基于核酸的治疗方法的分析方法.
