通过定量多重切割心脏2D-LC-MS的奇拉-奇拉2D-LC-MS推断氧利平的形成路径

科学领域:

• 脂管学和质谱学 质谱学
• 炎症和免疫学 炎症和免疫学
• 分析化学 分析化学

背景情况:

• 氧利平是炎症的关键调节剂,来自酶或自氧化途径.
• 目前的LC-MS/MS方法缺乏奇拉分离,这阻碍了精确的氧利平因反体量化.
• 区分形成路径对于理解氧利平的生物作用至关重要.

研究的目的:

• 开发一种敏感和选择性的方法来分离和量化氧利平酶体.
• 要区分氧利平形成的酶和自氧化途径.
• 准确识别专业的亲解决媒介 (SPMs) 和它们的立体化学.

主要方法:

• 开发一种二维液态色谱-并联质谱 (2D-LC-MS/MS) 方法.
• 利用多重心切切割来将氧利平转移到合柱上以进行反体分离.
• 实现了45对具有高灵敏度 (每列<1 pg) 的 (二) 基脂肪酸的反体对的分离.

主要成果:

• 开发的方法成功分离了氧利平的反体,使得度和反体分数的确定成为可能.
• 在M2类巨细胞中,证实了以 (S,S) - 反体的形式5,15-DiHEPE,7,17-DiHDHA和5,15-DiHETE的酶性形成.
• 自氧化途径与多个10,17-DiHDHA异构体的形成有关,并且观察到不当存储的血中的快速形成.

结论:

• 无脊椎 - 脊椎2D-LC-MS/MS方法为氧利平分析提供了前所未有的选择性.
• 精确的SPM识别需要对酶选择性分析,区分酶和自氧化产品.
• 不适当的样本存储可能导致二基脂肪酸的人工形成,需要小心处理.