一个新的无细胞和无病毒的SARS-CoV-2中和抗体ELISA基于特定站点的标记技术

科学领域:

• 免疫学 免疫学 免疫学
• 病毒学 病毒学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 由于COVID-19的流行,需要先进的方法来评估对SARS-CoV-2的免疫反应.
• 现有的检测可能无法完全捕捉抗体中和活性对进化的病毒菌株的细微差别.

研究的目的:

• 引入和验证一种新的,无细胞,无病毒的SARS-CoV-2中和抗体ELISA (NAb-ELISA).
• 证明该试验在评估疫苗诱导免疫力和对SARS-CoV-2及其变体的单克隆抗体中和方面的实用性.

主要方法:

• 开发了一个基于SARS-CoV-2尖端蛋白的受体结合域 (RBD) 和ACE2受体之间的竞争性抑制的NAb-ELISA.
• 使用特定地点的生物化 hACE2-Fc-Avi用于捕获和RBD-Fc-vHRP用于检测.
• 使用免疫小鼠血清验证了测试,并将结果与伪病毒中和测试 (pVNTs) 进行了比较.

主要成果:

• 在NAb-ELISA中,野生型和三角形变种的pVNT与pVNT有很强的相关性 (R2=0.91和0.90).
• 该试验检测到与pVNTs中度相关的交叉中和活性 (R2 = 0.70-0.83).
• 通过NAb-ELISA用于混合瘤查,成功识别了针对多个SARS-CoV-2变异的五种中和单克隆抗体.

结论:

• NAb-ELISA是一种快速,安全和有效的工具,用于表征SARS-CoV-2中和抗体反应.
• 这个平台可以很容易地适应监测对新兴病毒突变的免疫力.
• 促进针对SARS-CoV-2的疫苗和治疗方法的开发和评估.