修改的吞吐量宁氨酸方法用于对猪血中饮食蛋白质吸收的定性评估
Kateryna Pierzynowska1,2,3,4, Kamil Zaworski2,4, Piotr Wychowański4,5
1Department of Biology, Lund University, Sölvegatan 35, Lund, 22362, Sweden.
Biology methods & protocols
|November 8, 2024
概括
一种新方法测量了血中的衍生物氨基酸,以评估蛋白质消化,为外分胰腺功能缺陷 (EPI) 和营养不良提供了直接的生物标志物. 这种可靠的检测方法改善了间接便气测量.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 临床诊断 临床诊断 临床诊断
- 胃肠病学 胃肠病学
背景情况:
- 蛋白质消化不良和吸收不良是异位胰腺功能缺陷 (EPI) 的标志,导致营养不良.
- 目前的方法,比如便中的分析,间接评估蛋白酶的活性,是不理想的.
- 血液中的代表了大量 (高达80%) 的水解蛋白质,表明了潜在的消化直接测量.
研究的目的:
- 开发和验证一种用于测量血中酸衍生氨基酸的新方法.
- 建立这种方法作为蛋白质消化和吸收的相关和直接生物标志物.
- 在猪模型中评估方法的准确性,精度,线性和体内性能.
主要方法:
- 修改了一种高通量ninhydrin方法,以量化血中的酸衍生氨基酸.
- 使用10kDa切断离心过器从血样本中去除大型蛋白质.
- 在过血的水解前后测量自由和总氨基酸,通过减去计算衍生物氨基酸.
主要成果:
- 开发的方法显示了高精度 (近100%),极佳的精度 (RSD为0.88%) 和严格的线性 (r=0.986).
- 在生体内对猪进行的研究显示,大约2小时后,酸衍生氨基酸水平达到最大水平.
- 与EPI猪相比,健康猪的基氨基酸AUC和Cmax值明显高于EPI猪 (分别P=.0026和P=.0037).
结论:
- 高通量ninhydrin方法是一种敏感,可靠和实用的测试,用于估计饮食中的酸衍生氨基酸.
- 这种血测定作为评估蛋白质消化和吸收的直接和有效生物标志物.
- 这些发现支持其在诊断和管理诸如外分胰腺功能不全等疾病中的有用性.
