lysine deacylase sirtuin活动的生物发光测定

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 分子生物学分子生物学
• 细胞生物学 细胞生物学

背景情况:

• 氨酸酸化调节蛋白质的功能,定位和相互作用.
• 赛尔图因是解糖氨酸的关键酶,维持细胞平衡.
• 异常的Sirtuin表达与癌症等疾病有关,使其活动测量至关重要.

研究的目的:

• 开发一种高灵敏度测试,用于测量体外和体内素活性.
• 为了克服精确量化Sirtuin脱基化的挑战.
• 为探索sirtuins作为潜在的治疗点提供一个工具.

主要方法:

• 开发了"SIRTify",一种使用分离NanoLuc luciferase系统的测试方法.
• 该试验依赖于LgBiT和一个p86的补充.
• 氨酸对p86的乙化破坏了发光;氨酸的脱化恢复了它,产生了一种与活动成比例的信号.

主要成果:

• 在体外和体内,SIRTify准确地测量了Sirtuin的活性.
• 该试验显示了高灵敏度,并反映了已知的素特异性.
• 测量证实了Sirtuin调节剂的影响,并量化了脱动态.

结论:

• SIRTify是一个强大而灵敏的工具,用于量化Sirtuin活动.
• 这种测定有助于研究细胞平衡和疾病发病过程中的Sirtuin功能.
• SIRTify可以适应监测其他翻译后修改.