数百个T细胞受体的快速并行重建和特异性查
Alexander B Afeyan1,2, Catherine J Wu3,4,5,6, Giacomo Oliveira7,8,9
1Department of Medical Oncology, Dana-Farber Cancer Institute, Boston, MA, USA.
Nature protocols
|November 8, 2024
概括
研究人员开发了一种新方法来选T细胞受体 (TCR) 反应活性,使得在癌症和感染等疾病中研究免疫反应成为可能. 这种方法有效地识别了针对人类组织中特定抗原的TCR.
科学领域:
- 免疫学和分子生物学
- 查T细胞受体 (TCR) 查
- 抗原特异性T细胞的反应.
背景情况:
- 了解T细胞受体 (TCR) 反应性对于破译感染,癌症和自身免疫性疾病中的免疫反应至关重要.
- 鉴定多种TCRs对于描述由多种T细胞克隆驱动的免疫反应至关重要.
研究的目的:
- 提出一种中等通量方法,用于并行重建和选多个TCR.
- 能够同时对TCR进行对初级人体组织和各种抗原标的查.
- 为了促进抗瘤和抗病毒TCR活性和抗原特异性的表征.
主要方法:
- 利用吉布森组合和晶状病毒转导用于T细胞中的快速TCR克隆和表达.
- 采用组合性光染料标签,通过流式细胞计量进行聚合的TCR细胞系识别.
- 在与化目标细胞时通过CD137上调调节测量T细胞激活.
主要成果:
- 开发了一个可扩展的管道,用于选数十个TCRs对合成抗原或细胞标,包括人类瘤细胞.
- 从人类瘤透性淋巴细胞中成功解脱了TCRs的抗瘤和抗病毒活性和抗原特异性.
- 实时证明了聚合的TCR细胞系激活的真实时间解卷.
结论:
- 提出的方法提供了一种有效的方法来选TCR反应性对广泛的抗原面板.
- 该协议为在各种疾病背景下剖析T细胞介导的免疫反应提供了有价值的工具.
- 该方法需要标准的专业知识,从设计到数据分析大约需要两个月的时间.
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