在小鼠大脑中量化总,-Ser129和聚合α-synuclein的新型工具

科学领域:

• 神经科学和神经退行性疾病
• 生物化学和分子生物学
• 免疫学和测试发展

背景情况:

• 像帕金森病这样的同核蛋白病,以聚合和酸化的α-synuclein (α-synuclein) 的积累为特征.
• 现有的量化α-synuclein的试验往往缺乏与小鼠α-synuclein的交叉反应性或表现出较差的灵敏度,阻碍了广泛使用的小鼠模型的研究.
• 在临床前研究中,急需敏感且可靠的测定方法来测量动物模型中的总和酸化α-synuclein.

研究的目的:

• 开发和验证超敏感的免疫试验,以对大鼠和人类野生类型和酸化 (pS129) α-synuclein进行可靠的量化.
• 评估这些重构试验在评估小鼠大脑组织中α-synuclein酸化和聚合方面的有用性.
• 提供必要的工具,以推进临床前研究的synucleinopathy障碍.

主要方法:

• 重构了现有的AlphaLISA® SureFire® UltraTM总和ps129α-synuclein测定工具包.
• 针对小鼠和人类α-synuclein的超敏感量化 (量化下限[LLoQ] ≤0.5 pg/mL) 的重制试验的验证.
• 应用验证的测试,与α-synuclein聚合物ELISA一起,以分析小鼠大脑组织制剂.

主要成果:

• 成功开发出能够量化小鼠和人类野生类型和pS129α-synuclein的超敏感测试.
• 对于总和pS129α-synuclein的LLoQ ≤ 0.5 pg/mL实现了高灵敏度.
• 证明了新免疫试验与动物模型的兼容性,使得对小鼠大脑组织中α-synuclein病理的评估成为可能.

结论:

• 重制的免疫试验在人类和动物样本中提供了对α-synuclein的强大和超敏感检测.
• 这些测定与临床前小鼠模型兼容,解决了同核蛋白病理研究中的重大未满足需求.
• 开发的工具有潜力显著提升对α-synuclein酸化和聚合在synucleinopathies的理解.