在Schizosaccharomyces pombe中进行双路西法酶记者试验

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 遗传学 是一个遗传学.
• 酵母生物学的酵母生物学

背景情况:

• 双 luciferase 记者测试是测量基因表达的标准.
• Schizosaccharomyces pombe是真核细胞生物学研究的一个关键模型生物.
• 需要精确的方法来分析S. pombe.中的基因调节元素.

研究的目的:

• 提供一个详细的协议,用于执行双 luciferase 记者测定在 Schizosaccharomyces pombe.
• 为了能够对裂变酵母中的转录促进体和翻译启动信号进行表征.
• 建立一种可靠的方法来量化S. pombe.中的基因表达.

主要方法:

• 产生含有火虫光酶基因的记者等离子体,该等离子体处于感兴趣的遗传元素的控制之下.
• 在相同的等离子体上,从固定的促进物中共同表达Renilla luciferase基因以实现正常化.
• 在选择性介质中培养S. pombe变异体,并执行商业上可用的双光酶试验.

主要成果:

• 描述的方法允许准确测量记者基因活性.
• 该试验有效量化了S. pombe.中的特定遗传元素的调节功能.
• 该协议对于分析裂变酵母中的基因表达具有稳定性和可重复性.

结论:

• 双 luciferase 记者测定是研究 Schizosaccharomyces pombe 的基因调节的一个强大的工具.
• 该协议有助于详细分析裂变酵母中的转录和转化控制元素.
• 该方法为进一步对S. pombe.进行遗传和分子研究提供了基础.