通过四种脱细胞化方法对角膜 stromal 镜片的物理化学性质进行比较研究
Bingqing Sun1, Zhe Zhang1, Yanze Yu1
1Eye Institute and Department of Ophthalmology, Eye & ENT Hospital, Fudan University, Shanghai, 200031, China; Key Laboratory of Myopia and Related Eye Diseases, Chinese Academy of Medical Sciences, Shanghai, 200031, China; Shanghai Research Center of Ophthalmology and Optometry, Shanghai, 200031, China; Shanghai Engineering Research Center of Laser and Autostereoscopic 3D for Vision Care, Shanghai, 200031, China.
Experimental eye research
|November 13, 2024
概括
在对角膜晶片的四种脱细胞化方法进行比较时,Triton X-100加SDS被证明是最有效的. 这种方法可以去除细胞,同时保留角膜结构,细胞外基质和生物力学,以便进行潜在的移植.
科学领域:
- 生物材料科学 生物材料科学
- 眼科医生 眼科 眼科
- 组织工程是组织工程.
背景情况:
- 来自小切口镜片提取手术的 Corneal stromal 镜片是潜在的生物材料.
- 脱细胞化对于为移植和生物支架制造准备晶片至关重要.
- 评估不同的脱细胞化方法对于优化lenticule属性至关重要.
研究的目的:
- 为了比较四种脱细胞化方法对人类角膜 stromal 镜片的疗效.
- 评估脱细胞化对晶状体物理化学性质的影响,包括细胞性,细胞外矩阵完整性,生物力学和免疫性.
- 为潜在的临床应用确定最佳的脱细胞化方法.
主要方法:
- 通过使用二硫酸盐 (SDS),Triton X-100 (Tx) + SDS,素-EDTA (TE) 或NaCl + DNase,将人类角膜 stromal 镜片脱细胞化.
- 评估的物理化学性质包括DNA和糖氨基甘氨酸 (GAG) 含量,通过免疫光,透明度,生物力学 (Young的模量),组织学和免疫性 (HLA-DR,HLA-ABC,CD45) 的原蛋白完整性.
- 结果与新鲜的镜片进行了比较.
主要成果:
- 所有方法都有效地去除了细胞,没有显著的GAG损失. 在所有组中,DNA含量显著下降,在SDS和Tx+SDS中最多.
- 原I和IV光仅在TE组下降. Tx+SDS组表现出与新鲜晶片的组织学相似性.
- Tx+SDS和NaCl+DNase组显示HLA表达的显著减少. 在脱细胞化群体中,生物力学和透明度在很大程度上得到了保留.
结论:
- 特里顿X-100加SDS (Tx+SDS) 在不影响细胞外基质,生物力学或形态学的情况下有效地去细胞化角膜镜片.
- 这种方法显示出角膜晶片储存,移植和生物支架制造的巨大潜力.
- 进一步的研究可以探索Tx+SDS治疗的镜片的临床翻译.
