增强的纳米体驱动生物发光免疫测试用于快速检测parathion使用工程分裂-nanoluciferase
Yi-Fan Liang1, Qiu-Yue Pan1, Yu Wang2
1Guangdong Provincial Key Laboratory of Food Quality and Safety, College of Food Science, South China Agricultural University, Guangzhou, Guangdong, 510642, China.
Biosensors & bioelectronics
|November 16, 2024
概括
使用工程分裂纳米化酶 (NanoLuc) 的新型纳米体驱动生物发光免疫试验提供了对有机化农药parathion的增强检测. 这种NanoLuc Ternary Technology (NanoTeT) 系统为检测小分子污染物提供了更快,更敏感和更可靠的方法.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分析化学 分析化学
- 免疫技术是一种免疫技术.
背景情况:
- 有机酸盐农药,如帕拉,对公众健康和环境构成重大风险.
- 对于小分子污染物的现有免疫测试方法往往缺乏足够的灵敏度,速度或简单性.
- 基于纳米体的测试和分裂化酶系统为开发高度敏感和快速检测平台提供了潜力.
研究的目的:
- 开发一种增强的纳米体驱动生物发光免疫试验,用于敏感检测帕拉.
- 建立一个新的NanoLuc Ternary Technology (NanoTeT) 系统,以提高信号噪声比和测试性能.
- 为检测小分子污染物提供一个快速,均的免疫测试平台.
主要方法:
- 设计了一种使用分裂纳米化酶 (NanoLuc) 系统的同质免疫试验,最初称为NanoLuc二进制技术 (NanoBiT).
- 通过将NanoLuc 11S子单元分解成更小的组件 (Δ11S和β9) 开发了一种增强的NanoLuc三元技术 (NanoTeT).
- 标记为抗帕拉纳米体 (Nb) VHH9和人工抗原H1-卵蛋白 (H1-OVA) 具有特定的NanoLuc子单元用于测试构造.
主要成果:
- 与NanoBiT和ic-ELISA相比,NanoTeT系统实现了帕拉的低IC502.04 ng/mL,显著提高了灵敏度.
- 在蔬菜样本中表现出广泛的检测范围 (0.1922.11 ng/mL),高精度 (84.8%122%回收) 和精度 (CV <15%).
- 该试验需要一个简单的单步化,在10分钟内完成检测,比ic-ELISA的速度增加了7倍.
结论:
- 开发的NanoLuc Ternary Technology (NanoTeT) 为同质免疫测试提供了一个高度敏感,快速和强大的平台.
- 这种新的方法显著提高了小分子污染物的检测能力,例如有机酸盐农药.
- 简化测试格式和提高的性能使其适用于食品安全和环境监测的实际应用.
