使用in vivo共聚焦显微镜改善了角膜免疫细胞动态的跟踪

科学领域:

• 眼科和视觉科学 眼科和视觉科学
• 生物医学成像技术 生物医学成像技术
• 细胞生物学 细胞生物学

背景情况:

• 在生物共聚焦显微镜 (IVCM) 对于对眼睛细胞结构的非侵入性成像至关重要.
• 在IVCM的挑战包括眼动,导致噪音,视野有限,并难以跟踪细胞随着时间的推移.
• 现有的方法很难在活眼组织中连续识别和纵向跟踪单个细胞.

研究的目的:

• 开发和验证一种新的数据采集协议和用于处理IVCM视频的开源软件.
• 在IVCM录音中显著改善图像对比度,分辨率和视野.
• 为了能够高效准确地可视化和量化活眼中的单个细胞动态.

主要方法:

• 开发一个免费的,开源的Matlab软件包,用于IVCM视频的自动注册和处理.
• 实施数据采集协议,以从角膜上皮层和角膜层中获取"序列扫描"数据.
• 通过记录扫描从渐进的时间间隔进行纵向细胞跟踪来创建时间延迟视频.

主要成果:

• 定制软件在注册IVCM视频方面取得了很高的成功率 (97%用于上皮,93%用于肌层).
• 时间延迟的视频创建在93%的上皮和75%的树皮图像系列中取得了成功.
• 初步结果表明,它适合使用自适应光学扫描激光眼镜镜 (AOSLO) 进行视网膜成像.

结论:

• 提出的协议和软件大大提高了从IVCM数据中延时生成视频的效率和一致性.
• 这种方法促进了细胞动态的非侵入性研究,包括免疫细胞运动和探测,在人类角膜.
• 该方法有望推进对活眼的各种组织中细胞行为的纵向研究.