探索对Dirofilaria immitis microfilariae进行冷保存的替代方案

科学领域:

• 兽医寄生虫学 兽医寄生虫学
• 低温生物学 低温生物学

背景情况:

• 狗心病是由Dirofilaria immitis引起的,影响犬类和类动物.
• 之前的冷保存研究使用了 -70°C,其微菌 (mf) 存活率和形态不佳,或昂贵的液.
• 对于D. immitis mf.而言,需要具有成本效益和可访问的冷保存方法.

研究的目的:

• 开发和验证D. immitis mf在-80°C的冷保存方案.
• 创建一种适用于有限专业设备的实验室的方法.

主要方法:

• 开发了一个冷保护媒介:5%的DMSO,20%的新生小牛血清,75%的盐液.
• 稀释的感染狗血1:1与中等和储存在-80°C使用控制速率的冷容器.
• 每月评估mf的生存,运动,长度和形态,长达150天.

主要成果:

• 在冷保存后1天,达到了99%的D. immitis mf存活率.
• 120天后,生存率降至63%,观察到运动模式的变化.
• 超过50%的存活率在150天内保持不变,没有可检测的形态变化,但寿命缩短.

结论:

• 这项研究建立了第一个冷保存D. immitis mf在-80°C的方案.
• 该协议整合了冷保护剂和逐渐的温度过渡,提供了长期保存的可访问方法.
• 该方法支持在资源有限的环境中对狗心病的研究和诊断.