通过溶剂诱导的蛋白质沉和定量质谱法研究抗感染药物的向接触

科学领域:

• 生物化学 生化学
• 微生物学 微生物学
• 药物发现 药物发现 药物发现

背景情况:

• 抗菌素耐药性 (AMR) 是一个日益严重的全球卫生危机,由耐药性病原体的快速出现所驱动.
• 新抗微生物药物的开发速度缓慢,迫切需要创新的药物发现方法.
• 在药物开发管道的早期评估目标参与是至关重要的,但具有挑战性.

研究的目的:

• 引入和验证综合溶剂诱导蛋白沉 (iSPP) 作为评估药物标参与的快速方法.
• 应用iSPP来识别临床相关的抗微生物耐药病原体中的药物点.
• 为了证明iSPP在从基于目标的药物发现工作中评估化合物的实用性.

主要方法:

• 开发了一种针对细菌提取物的优化iSPP协议,最大限度地减少样本输入,完善变性梯度.
• 利用定量质谱法 (LC-MS/MS) 来分析对潜在药物化合物的反应中蛋白质稳定性的变化.
• 在四种关键的AMR病原体的细胞提取物上测试了iSPP方法: *大肠杆菌*, *肺炎菌*, * Pseudomonas aeruginosa* 和 *金黄色葡萄球菌*.

主要成果:

• 在四种测试的细菌物种中成功识别了七种不同药物的已知抗生素标.
• 对于5个小分子的被证明的目标参与,专门针对2-C-甲基-d-erythritol 4-phosphate (MEP) 途径中的酶.
• 在复杂的生物样本中验证了iSPP在识别化合物与其预期分子标之间的相互作用方面的有效性.

结论:

• iSPP是一种可适应和有效的方法,用于在早期抗微生物药物发现中快速评估目标参与.
• 该iSPP工作流程有助于识别抗感染药物标,解决打击AMR的一个关键瓶.
• 这种技术促进了对抗耐药性感染的新疗法的开发.