快速和视觉检测Pyricularia oryzae使用合复合酶聚合酶放大-横向流量滴针测试

科学领域:

• 植物病理学 植物病理学
• 分子生物学分子生物学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 米爆发,由*Pyricularia oryzae*引起,是全球大米生产的重大威胁.
• 有效的疾病管理依赖于快速准确地检测病原体.

研究的目的:

• 开发一种快速,灵敏和特定的Pyricularia oryzae*的诊断试验.
• 评估测试在现场样本和早期感染阶段检测病原体的性能.

主要方法:

• 开发一种复合聚合酶放大-侧流滴杆 (RPA-LFD) 试验.
• 针对MGG_15975基因的特定物种RPA原料和探针的设计.
• 优化反应条件 (37°C 25分钟) 和使用真菌分离物和大米植物样本进行验证.

主要成果:

• RPA-LFD测定特别检测到来自大米的P. oryzae,没有与其他真菌或来自草的Pyricularia物种的交叉反应.
• 该试验表现出高灵敏度,检测到基因组DNA的低至10-2 ng/microl,比传统PCR敏感100倍.
• 在患病的叶中成功检测了P. oryzae,并在人工接种的苗木中确定了早期感染.

结论:

• 开发的RPA-LFD测定是一种快速,高度敏感和高效的工具,用于检测Pyricularia oryzae.
• 这种测试具有很大的潜力,可以在农业环境中早期诊断大米爆发,促进及时干预和减少作物损失.