在不同条件下存储小鼠丸后的RNA质量和蛋白胺基因表达

科学领域:

• 生殖生物学 生殖生物学
• 分子生物学分子生物学
• 遗传学 遗传学 是一个

背景情况:

• 质氨酸对于精子染色质凝聚是必不可少的,它们的恒定比率与生育能力有关.
• 准确量化质氨酸表达需要优化样本采集和保存协议.

研究的目的:

• 评估不同保存缓冲器 (RNAlater®,NAP-缓冲器) 和温度对小鼠丸RNA质量和原胺基因表达的影响.
• 为了确定最佳的储存条件,在长时间内保持RNA完整性和原氨酸比率.

主要方法:

• 鼠标丸样本在RNAlater®或NAP缓冲器中在各种温度下 (RT,4°C,-20°C,-80°C,液) 保存长达一年.
• 评估了RNA质量和完整性,并使用qPCR用18SrRNA作为参考基因量化了前胺基因表达.

主要成果:

• 在 -80°C的RNAlater®或NAP缓冲器中保存,产生了高质量的RNA和稳定的蛋白胺表达,与体质组织相美.
• 在室温下储存一周,保持了RNA质量和质氨酸表达.
• 在4°C和-20°C储存的样本显示RNA完整性和质氨酸表达水平与80°C储存相似.
• 液快速冷和随后在-80°C或196°C的储存提供了很好的保存.

结论:

• RNAlater®和NAP缓冲器有效地保护小鼠丸样本用于原胺表达分析.
• -80°C或更低的温度可确保长期的RNA完整性和质氨酸比率稳定性.
• 这些发现有助于在实地条件下进行可靠的样本采集,运输和储存,以进行生殖研究.