基于SERS的CRISPR/Cas12a测定蛋白质生物标志物前列腺特异性抗原检测
Peijun Teng1, Zhixing Gao1, Qiang Quan2
1GuangDong Engineering Technology Research Center of Antibody Drug and Immunoassay, Department of Biological Sciences and Biotechnology, College of Life Science and Technology, Jinan University, Guangzhou, 510632, China.
Analytical and bioanalytical chemistry
|November 22, 2024
概括
我们开发了基于敏感表面增强拉曼散射 (SERS) 的CRISPR/Cas12a测试来检测蛋白质生物标志物. 这些SERS-CRISPR方法,包括S-CasLISA和S-Apt-CRISPR,在临床样本中准确检测皮克格拉姆水平的前列腺特异抗原.
科学领域:
- 生物医学工程 生物医学工程
- 分析化学 分析化学
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 敏感和准确的蛋白质生物标志物检测对于早期疾病诊断至关重要.
- 目前的方法可能缺乏灵敏度或需要复杂的程序.
- 克里斯普尔/Cas12a系统提供精确的分子检测能力.
研究的目的:
- 开发基于表面增强拉曼散射 (SERS) 的新型CRISPR/Cas12a试验,用于检测敏感蛋白质生物标志物.
- 建立SERS-CRISPR测试以检测前列腺特异性抗原 (PSA) 的图形图级检测.
- 评估开发的SERS-CRISPR试验的临床适用性和准确性.
主要方法:
- 使用捕获抗体和DNA标记检测抗体开发SERS-CRISPR驱动的酶链接免疫吸收试验 (S-CasLISA).
- 与SERS-CRISPR (S-Apt-CRISPR) 集成的阿普坦,以实现简化,高度选择性的蛋白质检测.
- 使用SERS进行信号放大和CRISPR/Cas12a用于目标识别和附带裂解.
主要成果:
- 对于PSA,S-CasLISA实现了0.17 pg mL-1的检测极限 (LoD),其动态范围为0.1-10 ng mL-1.1.
- 对于PSA,S-Apt-CRISPR显示了0.35 pg mL-1的负载值,通过消除洗步骤来简化检测.
- 两种SERS-CRISPR测试都显示了与化学发光免疫测试可比的准确性,当与临床样本进行验证时.
结论:
- 基于SERS的CRISPR/Cas12a测定显著提高了蛋白质生物标志物检测的分析能力.
- 这些测试具有很高的灵敏度和准确性,适用于早期疾病诊断.
- 开发的SERS-CRISPR平台扩大了敏感和准确的蛋白质分析的应用.
