合理的哈普顿设计,抗体制备和免疫测试开发,用于快速查生物样本中的克西拉
Liang Luo1, Yingjie Zhang2, Xiangjun Zhao2
1National Key Laboratory of Veterinary Public Health and Safety, Beijing Key Laboratory of Detection Technology for Animal Derived Food Safety, College of Veterinary Medicine, China Agricultural University, Beijing 100193, People's Republic of China; Technology Innovation Center for Food Safety Surveillance and Detection (Hainan), Sanya Institute of China Agricultural University, Sanya 572025, People's Republic of China.
Food chemistry
|November 22, 2024
概括
克西拉 (XYL) 造是一种公共卫生风险. 这项研究开发了高度敏感的免疫测试,用于在尿液和食物中快速检测XYL,提供了关键的查工具.
科学领域:
- 分析化学 分析化学
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 法医科学 法医科学 法医科学
背景情况:
- 克西拉 (XYL) 是阿片类药物中的非法奸剂和兽用镇静剂,由于滥用,滥用和污染,它对健康构成重大风险.
- 目前的XYL检测方法可能缺乏在各种矩阵中快速选所需的灵敏度或速度.
- 使用抗体的免疫测试提供了一种有希望的方法,用于敏感和快速检测XYL.
研究的目的:
- 设计新型XYL素并产生高亲和度,特定单克隆抗体 (mAbs) 用于XYL检测.
- 为XYL查开发高度敏感的间接竞争ELISA (icELISA) 和侧流免疫试验 (LFIA).
- 探索开发的mAbs.的分子识别机制.
主要方法:
- 理性设计四个新的XYL哈普顿与不同的间隔臂.
- 单克隆抗体 (mAbs) 的生产和查,以表征亲和力和特异性.
- 使用异质哈普用于XYL检测的icELISA和LFIA的建立.
- 在人类尿液和食品样本中验证分析,包括回收和变化系数 (CV) 分析.
主要成果:
- 产生了10个mAbs;mAb 7H5显示出高亲和力 (IC50 = 0.23 ng/mL) 和低交叉反应性.
- 确定了敏感的icELISA,LODs为0.10-2.24μg/L,并且恢复良好 (83.5%-128.6%).
- 开发了具有0.10-1.80μg/L视觉LOD和定义的切线值的快速LFIA.
- 研究了mAbs的分子识别机制.
结论:
- 为XYL检测成功开发了新型的哈普和高 afinity mAbs.
- 建立了灵敏和快速的icELISA和LFIA方法,用于在人体尿液和食物中的XYL查.
- 这些免疫测试首次为快速XYL查提供了强大的工具,解决了公共卫生和法医方面的问题.
