使用微波辐射的加速蛋白质保留扩张显微镜.

科学领域:

• 细胞生物学 细胞生物学
• 显微镜技术 显微镜技术
• 神经科学是一个神经科学.

背景情况:

• 扩展显微镜 (ExM) 通过同位素扩展的固定组织在常规显微镜上实现纳米级成像 (<70 nm).
• 标准的ExM协议是漫长的,通常需要几天才能完成.
• 高效的ExM对于高分辨率的生物研究至关重要.

研究的目的:

• 调整和优化ExM协议以更快地处理生物样本.
• 调查微波 (M/W) 辅助在加速ExM工作流程中的有效性.
• 为了证明M/W辅助ExM (M/W-ExM) 协议在不同物种和组织类型中的适用性.

主要方法:

• 适应的ExM为vibratome切割的Xenopus laevis头的大脑.
• 实施微波 (M/W) 辐射,以创建一个快速的M/W-ExM协议.
• 将M/W-ExM协议应用于整个山上的Drosophila melanogaster大脑.

主要成果:

• 减少了Xenopus脑组织的ExM工作流程时间,从几天减少到几个小时.
• 实现了与标准ExM相比较的超级纳米分辨率.
• 观察到M/W-ExM的扩张幅度增加.
• 成功地将Drosophila IHC-ExM的处理时间从6天减少到2天.

结论:

• 微波辅助ExM (M/W-ExM) 在保持高分辨率的同时显著加速了ExM协议.
• M/W 辐射似乎增强了组织扩张过程.
• M/W-ExM协议可以适应不同的生物和组织类型,提高实验效率.