快速检测Puccinia striiformis f. sp. 的情况 从小麦条纹生样本中取出tritici,使用复合酶聚合酶放大与多种可视化方法相结合
Xuan Lv1, Jiarui Jiang1, Ziqian Yang1
1Department of Plant Pathology, Ministry of Agriculture and Rural Affairs (MOA) Key Lab of Pest Monitoring and Green Management, College of Plant Protection, China Agricultural University, Beijing 100193, China.
International journal of biological macromolecules
|November 23, 2024
概括
研究人员开发了三种快速复合酶聚合酶放大 (RPA) 试验,以检测Puccinia striiformis f. sp. (Pst),是导致小麦条纹生的真菌. 在RPA侧流量测量棒 (RPA-LFD) 测试显示在现场样本中检测Pst的最高灵敏度.
科学领域:
- 植物病理学 植物病理学
- 分子生物学分子生物学
- 农业科学 农业科学
背景情况:
- 小麦条纹生,是由Puccinia striiformis f. sp. 引起的 三 (Pst),导致农作物质量显著下降和产量损失.
- 准确及时监测Pst对于有效的现场管理和疾病控制策略至关重要.
研究的目的:
- 开发和评估用于检测Pst的快速,敏感和实用的分子诊断试验.
- 为了比较三种基于重组酶聚合酶放大 (RPA) 的方法的性能:RPA与凝电泳,RPA-侧流测量棒 (RPA-LFD) 和实时RPA.
主要方法:
- 开发了针对Pst的三个RPA测试,使用39°C的同热放大.
- 基于反应时间,针对其他小麦病原体的特异性,检测极限和对现场采集的叶样的应用,评估了测试性能.
- 评估了可视化方法,包括阿加罗斯凝电泳,侧流测量棒和实时检测.
主要成果:
- 所有三个RPA测定都检测到Pst迅速 (20-30分钟) 和具体地.
- RPA-LFD测定显示出最高的灵敏度,检测极限为10^4 fg/μL.
- 在实地试验中,RPA-LFD在82.2%的样本中正确识别了Pst,性能优于标准RPA和实时RPA.
结论:
- 基于RPA的测试提供了一种简单,快速和实用的方法来检测Pst.
- RPA-LFD测定是一种高度敏感和有前途的工具,用于在田间条件下对小麦条纹生的分子诊断.
关键词:
快速分子检测方法侧向流量测量棒 横向流量测量棒普奇尼亚形虫 (Puccinia striiformis f. sp. f. sp.) 是一种形虫. 这里是Triticity和Triticity的位置.实时的RPA可以实现.复合酶聚合酶放大复合酶的放大.
