用和同位素对可活的外周血液单核细胞进行条形编码,用于质细胞计实验
Youngran Seo1, Ken Fowler2, Leah M Flick2
1School of Chemical and Biological Engineering, Seoul National University, Seoul, Korea.
概括
新型含化合物 (SeMals) 实现了用于质量细胞计的高效细胞条形码. 这种方法消除了批量效应,并扩大了没有表面标记的同位素标记选项,改善了数据采集和细胞分析.
科学领域:
- 分析化学 分析化学
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 批量效应和中断的数据采集阻碍了序列细胞染色.
- 现有的活细胞条形码方法依赖于表面标记,限制了细胞类型的适用性.
研究的目的:
- 引入用于细胞标签的新型含化合物 (SeMals).
- 开发一种新的细胞条码策略,用于使用和同位素进行质量细胞计.
- 克服当前条形码技术的局限性,使更广泛的细胞分析成为可能.
主要方法:
- 三种同位素纯马利胺试剂 (SeMals) 的合成和表征.
- 用SeMals.对可活和固定的外周血液单核细胞 (PBMCs) 进行共价标记.
- 21个PBMC样品的组合条形码使用SeMals和 Maleimides.
- 条码样本的聚合,染色和质细胞测量采集.
- 拆解组合数据的条形码,用于样本特定分析.
主要成果:
- SeMal试剂有效标记可行的和固定的PBMC,其光谱溢出影响最小.
- 在SeMal和同位素组合允许21个样本的独特条形码.
- 集成收购和随后的去条形码化促进了不间断的仪器运行.
- 对于每个捐赠者的复制品,表型特征被一致地复制.
- 该方法成功标记了所有细胞,无论表面标记物表达如何.
结论:
- 在质细胞测量中,SeMals为活细胞条形码提供了一种无毒,有效的工具.
- 这种方法扩大了可用于条形码的可用同位素,释放了用于抗体染色的常用同位素.
- 基于SeMal的方法提高了吞吐量,并允许在不依赖表面标记器的情况下进行全面的细胞分析.
关键词:
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