液体-液体提取相的在线直接输液质谱,用于使用直接输液探针进行代谢物和脂质分析

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 分析化学 分析化学
• 细胞生物学 细胞生物学

背景情况:

• 代谢物和脂质分析为生物过程提供了关键的见解.
• 由于染色学限制,同时检测具有挑战性.
• 直接输液质谱法 (MS) 允许同时检测,但受到矩阵效应的影响.

研究的目的:

• 开发一种同时检测代谢物和脂质的方法,提高灵敏度和分子覆盖率.
• 在复杂的生物样本中克服直接输注MS的局限性.
• 为了研究细胞代谢中的动态变化.

主要方法:

• 结合直接输液探针 (DIP) 与液液提取 (LLE) 减少样品复杂性.
• 评估了三种LLE方法,选择了butanol-methanol (BUME) 方法,因为它的效率和低毒性.
• 应用了BUME DIP-MS方法来分析用葡萄糖刺激的胰岛素分泌细胞.

主要成果:

• 丁醇-甲醇 (BUME) 液体-液体提取方法证明了高分子覆盖率和低溶剂毒性.
• BUME DIP-MS方法提供了快速而敏感的细胞化学变化的分析.
• 在分泌胰岛素的细胞中观察到细胞内代谢的高动态,每隔1分钟.

结论:

• 开发的LLE DIP-MS工作流显著提高了对相分离代谢物和脂质的敏感性.
• BUME DIP-MS为INS-1细胞在胰岛素释放过程中的动态细胞内代谢提供了新的见解.
• 这种方法有助于更深入地了解细胞反应中的代谢物和脂类动态.