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Updated: Jun 6, 2025
08:38
Scalable Transfection of Maize Mesophyll Protoplasts
Published on: June 23, 2023
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化促进了原生细胞的转化和基因组编辑效率
Yunsun Kim1, Eunbin Lee1, Beum-Chang Kang1
1Department of Horticulture, College of Agricultural Life Science, Jeonbuk National University, Jeonju, Republic of Korea.
Physiologia plantarum
|November 28, 2024
概括
在黑暗中生长的植物,显著提高了无DNA基因组编辑效率在植物原生质. 这种方法增强了聚类定期间隔的短平行体重复 (CRISPR) 交付,以改善和中国卷心菜等作物中的基因编辑结果.
科学领域:
- 植物生物技术 植物生物技术
- 分子生物学分子生物学
- 农业科学 农业科学
背景情况:
- 使用集群定期间隔的短平行体重复 (CRISPR) - 核核蛋白 (RNP) 的无DNA基因组编辑提供了诸如避免转基因整合和减少非目标突变等优势.
- 优化原生细胞转染对于最大限度地提高植物CRISPR-RNP中介基因编辑的效率至关重要.
研究的目的:
- 为了研究化 (黑暗暴露) 对植物原生质的转化效率的影响.
- 为了确定是否etiolation增强使用CRISPR-RNP在生菜和中国卷心菜的DNA免费基因组编辑.
主要方法:
- 植物苗 (生菜和中国卷心菜) 在非化,化和脱化条件下种植.
- 通过聚乙烯糖醇 (PEG) 介导的转染被用于评估绿色光蛋白 (GFP) 表达后的转化.
- 进行了CRISPR-RNP传递,用于编辑内源基因 (LsPDS,LsFT) 的etiolated原生体,编辑效率通过向深度测序来量化.
主要成果:
- 与非乙烯基质原体相比,乙烯基质原体的转染效率显著提高,GFP表达得到了3.1倍 (生菜) 和4.8倍 (中国白菜) 的改善.
- 使用CRISPR-RNP的基因编辑效率在两种物种的etiolated原生质中最高.
- 沙拉中的LsPDS和LsFT基因的编辑效率分别提高了8.7倍和4.4倍,在以化原生体中.
结论:
- 幼苗生长期间的化是一种有效的策略,可以提高原生细胞转化效率.
- 暴露在黑暗中改善了植物原生质中的无DNA基因组编辑结果,为作物改进提供了一种有前途的方法.
