3-岩石相互作用和益菌功能:内基CKD风险等位基因的解决机制

科学领域:

• 腎病學和分子生物學.

背景情况:

• 在Shroom3中,单核酸多态 (SNP) 与慢性病 (CKD) 有关.
• 施罗姆3调解了TGFβ1和Wnt/Ctnnb1通路之间的交叉,促进纤维化 (TIF).
• Shroom3具有性作用,据报道,它在蛋白尿症中起到有益的作用.

研究的目的:

• 识别特定的益菌性Shroom3动机.
• 调查Shroom3中介Rho-kinase (ROCK) 激活在益纤维细胞功能中的作用,特别是在高Shroom3表达者中.
• 测试假设Shroom3的ASD2域通过ROCK激活对其益纤维功能至关重要.

主要方法:

• 开发的转基因小鼠和具有诱导性过度表达野生类型 (WT-Sh3) 或ASD2-域删除Shroom3 (ASD2Δ-Sh3) 的细胞系.
• 在具有ASD2Δ-Sh3.3的HEK293T细胞中确认了ROCK结合和TGFβ1信号抑制.
• 在mIMCD和3T3细胞中评估了ROCK激活 (-MYPT1),亲纤维/炎症转录和纤维细胞增殖.
• 在小鼠中利用了尿路阻塞 (UUO) 和阿里斯托洛奇酸 (AAN) 模型.
• 在WT-Sh3和ASD2Δ-Sh3小鼠中分析了转录组和蛋白尿.

主要成果:

• ASD2Δ-Sh3过度表达抑制了ROCK激活,并减少了mIMCD细胞中的亲纤维/炎症标志物.
• ASD2Δ-Sh3过度表达减少了纤维细胞的增殖.
• 在AAN和UUO模型中,与ASD2Δ-Sh3.3相比,WT-Sh3过度表达加剧了损伤,血和纤维化.
• 在WT-Sh3小鼠中的转录组显示Rho-GTPase,TGFβ1和Wnt/CtnnB1信号的丰富.
• WT-Sh3小鼠患有白色素尿,而ASD2Δ-Sh3小鼠没有;突变Fyn结合基因诱导白色素尿.

结论:

• 在Shroom3的Rock-bindingASD2域对于在Shroom3过量的情况下调解纤维化至关重要.
• 这种机制与人类的CKD有关.
• Shroom3在病理学中表现出动机特异性的作用,ASD2域与纤维化有关,另一个动机与蛋白尿有关.