快速量化小鼠胆汁酸使用液体染色学-并联质谱法
Sven Hermeling1,2, Johannes Plagge1, Sabrina Krautbauer2
1ZIEL Institute for Food & Health, Research Group Lipid Metabolism, Technical University Munich, Munich, Germany.
Analytical and bioanalytical chemistry
|December 2, 2024
概括
这项研究引入了一种快速的液体色谱-并联质谱法,用于量化小鼠样本中的胆酸 (BA). 高通量方法使得主要的小鼠BA的快速和可重复分析成为可能,这对于疾病研究至关重要.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分析化学 分析化学
- 质谱测量质量谱测量
背景情况:
- 胆汁酸 (BAs) 越来越被认为是关键的信号分子.
- BA与结肠癌和代谢综合征等疾病有关.
- 目前的BA分析方法耗时,限制了大规模研究.
研究的目的:
- 开发一种高通量液态色谱-并联质谱法 (LC-MS/MS) 方法,用于量化小鼠样本中的胆酸.
- 为了能够快速和可重复分析主要的小鼠胆汁酸.
主要方法:
- 酸性蛋白质沉,然后在基性pH下使用梯度化在双柱上进行分离.
- 使用六点校准曲线和稳定同位素标记内部标准 (SIL-ISs) 的量化.
- 使用血质量控制 (QC) 验证的方法,并根据样品材料要求进行测试.
主要成果:
- 在6.5分钟内快速分离27种BA物种,在分离特定的木酸 (MCA) 异构体方面存在挑战.
- 大多数BA的高精度 (CV<10%),GHDCA和THDCA由于缺少SIL-IS而例外.
- 由于SIL-IS的同位素纯度问题,一些BA的量化极限 (LoQ) 受到损害.
结论:
- 开发的LC-MS/MS方法提供了一个快速和可重复的量化主要的小鼠胆汁酸.
- 这种方法支持研究BA在健康和疾病中的作用的大规模研究.
- 对于某些BA物种,需要进一步优化SIL-IS纯度.
