通过CRISPR-Cas9基于核核蛋白的有效多基因基因组编辑,将Brassica napus传递到美索菲尔原生体中

科学领域:

• 植物生物技术 植物生物技术
• 农业科学 农业科学
• 分子生物学分子生物学

背景情况:

• 科拉 (Brassica napus L.) 的繁殖受到低遗传多样性和复杂的多体遗传学的阻碍.
• 转基因方法面临监管障碍和公众接受问题.
• 基因组编辑为特征改进提供了一个替代方案,而不需要传统的转基因担忧.

研究的目的:

• 开发和介绍一种使用CRISPR-Cas9核糖蛋白 (RNP) 进行甘露的无DNA基因组编辑方法.
• 为了使指导RNA (gRNA) 设计能够进行高吞吐量体内测试,以实现高效的编辑.
• 克服转基因方法在作物改良方面的局限性.

主要方法:

• 直接将CRISPR-Cas9 RNP传递给大豆中细胞原体.
• 组织培养RNP转化原生体的再生成芽.
• 在目标位置检查再生芽的基因突变.

主要成果:

• 在甘中实现了无DNA基因组编辑的高效率.
• 62%的再生芽表现出一个或多个突变的标基因.
• 50%的再生芽在两个向位置都表现出双基突变.
• 在体内高效的gRNA设计测试集成到转化过程中.

结论:

• 没有DNA的CRISPR-Cas9 RNP传递是一种有效的甘基因组编辑策略.
• 该方法有助于快速评估和选择最佳的gRNA设计.
• 这种方法提供了一个可行的替代品转基因方法,用于改善兰花特征.