双CRISPR/Cas12a辅助的RT-RAA可视化系统用于快速地在现场检测神经亡病毒 (NNV)
Jie Gao1, Siyou Huang1, Jing Jiang1
1State Key Laboratory of Biocontrol, Southern Marine Science and Engineering Guangdong Laboratory (Zhuhai), China-ASEAN Belt and Road Joint Laboratory on Mariculture Technology, Guangdong Provincial Key Laboratory of Aquatic Economic Animals, School of Life Sciences, Sun Yat-sen University, China.
Analytica chimica acta
|December 6, 2024
概括
一个新的双CRISPR/Cas12a辅助RT-RAA可视化系统可以快速准确地检测鱼类中的神经性亡病毒 (NNV). 这种具有成本效益的现场方法有助于及时干预水产养殖,防止重大经济损失.
科学领域:
- 水产养殖是水产养殖的一种方式.
- 分子诊断学 分子诊断
- 病毒疾病检测检测 病毒疾病检测
背景情况:
- 神经性亡病毒 (NNV) 导致水产养殖业的严重死亡率和经济损失.
- 传统的NNV检测方法缓慢,劳动密集,容易受到污染.
- 快速地在现场检测NNV对于鱼类养殖场的有效疾病管理至关重要.
研究的目的:
- 开发一个快速的,单管可视化系统,用于在现场检测NNV.
- 为渔场经营者创建一个具有成本效益和可靠的诊断工具.
- 加强对抗 NNV 爆发的早期干预策略.
主要方法:
- 使用双CRISPR/Cas12a辅助的逆转录-重组酶辅助放大 (RT-RAA) 检测方法.
- 专门设计的RT-RAA和CRISPRRNA (crRNA) 启动组针对NNV囊蛋白 (CP) 和依赖RNA的RNA聚合酶 (RdRp) 基因.
- 采用光强度,以清晰,积极的结果可视化.
主要成果:
- 开发的系统在30分钟内实现了检测,其极限为0.5副本/μL.
- 与定量RT-PCR (qRT-PCR) 相比,证明了100%的准确性.
- 在32个实地样本中得到验证,证实了实用的实用性和可靠性.
结论:
- 本研究介绍了第一个双CRISPR/Cas12a辅助的RT-RAA可视化系统,用于NNV诊断.
- 该系统提供了一种快速,可靠和具有成本效益的解决方案,用于在水产养殖中现场检测NNV.
- 这项创新提高了诊断能力,使NNV疫情的及时干预和减轻经济影响成为可能.
