流细胞计分析人类血小板组织因子表达的分析
Marta Brambilla1, Alessia Becchetti1, Kevin Nallio1
1Centro Cardiologico Monzino IRCCS.
Journal of visualized experiments : JoVE
|December 9, 2024
概括
这项研究提出了一个标准化的流细胞测量协议,以准确测量组织因子 (TF) 阳性血小板,这对于在临床环境中评估血栓形成风险至关重要. 该方法量化了来自全血或血的静止和激活血小板的细胞内和表面TF.
科学领域:
- 血液学 血液学 血液学
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 组织因子 (TF) 是血液凝固和血栓形成的关键启动因子.
- TF在人体血小板的一个子集中被细胞内存储,并在激活时暴露.
- 增加的TF阳性血小板与前血栓状况相关,但它们的准确测量具有挑战性.
研究的目的:
- 为量化TF阳性血小板建立一个标准化的流细胞测量协议.
- 为了能够对各种血小板制剂中的细胞内和表面TF进行可靠的评估.
- 为了解决TF阳性血小板评价过去的争议.
主要方法:
- 关于全血,富血小板血 (PRP) 和洗净血小板中的TF阳性血小板的流动细胞计分析的详细协议.
- 包括采样,制备,细胞刺激,标记,固定和透的程序.
- 关于流细胞计设置的具体指南,用于准确识别血小板群体和TF事件分析.
主要成果:
- 该协议允许在休息和激活条件下量化TF-阳性血小板.
- 它区分了细胞内和表面的TF表达.
- 该方法适用于全血和单独的血小板分量,并考虑PRP制备.
结论:
- 一个标准化,详细的协议测量TF-阳性血小板使用流细胞计已经开发.
- 该方法为评估血小板相关的TF提供了可靠的工具,有助于评估血栓形成风险.
- 该协议涉及预分析变量,并为准确量化提供了全面的步骤.
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