建设一个微流体SELEX平台,用于高效选先进的糖化终产品胺体
Shikun Zhang1, Zhiyuan Ning1, Yingming Zhang1
1State Key Laboratory of Food Science and Resources, Jiangnan University, Wuxi, 214122, China; School of Food Science and Technology, Jiangnan University, Wuxi, 214122, China.
Biosensors & bioelectronics
|December 9, 2024
概括
一个新的微流体平台简化了吸收体选择,显著提高了效率和便利性. 这种方法成功地识别了Nε-carboxymethyl lysine和Nε-carboxyethyl lysine的高亲和度吸收体.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分子生物学分子生物学
- 分析化学 分析化学
背景情况:
- 亚胺是通过指数式丰富 (SELEX) 的联体的系统演化选择的关键识别分子.
- 传统的SELEX方法是低效的,需要大量的循环,并阻碍了aptamer的发展.
研究的目的:
- 开发一个集成和方便的微流体SELEX平台,用于增强的吸收体查.
- 为了识别和优化针对Nε-carboxymethyl lysine (CML) 和Nε-carboxyethyl lysine (CEL) 的阿普坦.
主要方法:
- 设计和实施使用捕获SELEX的微流体SELEX平台.
- 查阿帕特默对CML和CEL的查目标,共进行8轮.
- 使用异热定位热量测量 (ITC) 和SYBR GREEN I (SGI) 试验的aptamer亲和度和特异性的表征,并通过分子对接进行优化.
主要成果:
- 鉴定出Aptamer S2对CML和CEL具有很高的亲和力和特异性.
- 优化导致了一个截断的阿帕特马,S2-40,表现出优越的结合亲和力 (Kd为6.65±3.07μM通过ITC,42.1±9.34nM通过SGI).
- 微流体平台在SELEX过程中展示了增加的集成和便利性.
结论:
- 开发的微流体 SELEX 平台提供了一种更高效和更易于使用的方法来发现阿普坦.
- 经过优化,如S2-40,对特定的分子标显示出更强的性能.
- 这项技术有望在各个领域推进aptamer应用.
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