活细胞中的酶活动的空间定量成像
Rui Wang1, Lei Zhou2, Yueyan Yang2
1State Key Laboratory of Digital Medical Engineering, School of Biological Science and Medical Engineering, Southeast University, Nanjing, Jiangsu 210096, China.
Journal of the American Chemical Society
|December 10, 2024
概括
研究人员开发了一种自我引用的拉曼探针 (Yne-CBT),用于对活细胞中的甲素B (CTSB) 活性进行定量成像. 这种方法克服了当前探针的局限性,使细胞异质性的直接可视化成为可能.
科学领域:
- 生物化学
- 细胞生物学
- 化学生物学
背景情况:
- 酶活性对于理解细胞异质性至关重要.
- 现有的成像探测器有其局限性,例如记忆时间短,缺乏内部引用.
- 在活细胞中对酶活性进行空间定量成像是具有挑战性的.
研究的目的:
- 设计一个自我引用的拉曼探针用于细胞内甲B (CTSB) 活性的定量成像.
- 克服目前用于评估细胞异质性的成像探测器的局限性.
- 通过酶活性成像来直接和定量显示细胞异质性.
主要方法:
- 自参照拉曼探测器的合理设计,Yne-CBT.
- 使用细胞内甲素B (CTSB) 启动的点击反应来激活和保留探针.
- 使用外隔离的纳米粒子增强拉曼光谱 (SHINERS) 进行体外检测.
- 在活细胞中应用微流体通道进行空间定量成像.
主要成果:
- Yne-CBT探头经历了由CTSB启动的点击反应,形成长期保留的循环二元体.
- 探测器的CC和CN键的拉曼信号变化允许自我引用和定量成像.
- 在体外,Yne-CBT达到CTSB活性61. 4U L-1的检测极限.
- 在活细胞中成功地进行了CTSB活动的空间定量成像.
结论:
- 开发的Yne-CBT探测器为成像CTSB活动提供了自我引用和定量方法.
- 这一策略有效地解决了细胞成像中的探针保留和内部引用的局限性.
- 这种方法提供了一种通过酶活性直接和定量显示细胞异质性的简单方法.
