实施和验证一种新的qPCR试验,以检测进口人类菌物种
Camille Cordier1,2, Samia Hamane1, Théo Ghelfenstein-Ferreira1,3
1Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, Hôpital Saint-Louis, Assistance Publique-Hôpitaux de Paris, Paris, France.
Microbiology spectrum
|December 10, 2024
概括
新的实时PCR (qPCR) 试验能够准确地检测和量化所有人类等离子体物种,改善了进口疟疾的诊断,特别是在低寄生病和混合感染方面.
科学领域:
- 分子寄生虫学和传染病诊断.
- 开发和验证核酸放大检测试验用于检测Plasmodium.
背景情况:
- 进口疟疾诊断依赖于显微镜,免疫染色学或DNA放大,每个都有灵敏度和物种识别的限制.
- 目前的分子方法可能缺乏识别所有Plasmodium物种或量化寄生虫负载的能力.
- 进口疟疾在非流行地区的发病率不断上升,需要改进诊断工具.
研究的目的:
- 开发和评估双重和特定物种实时PCR (qPCR) 试验,以识别和量化人类菌物种.
- 为了比较开发的qPCR测定与进口疟疾标准诊断方法的性能.
主要方法:
- 双重体的发展 (Plasmodium spp. 菌种类. 和P. falciparum) 和针对18S核糖体RNA基因的物种特异性qPCR测定.
- 使用开发的qPCR试验,对410名疑似疟疾患者的523个潜在样本进行了测试.
- 将qPCR结果与血液涂抹 (BS) 和免疫染色学测试 (ICT) 的比较.
主要成果:
- 双重qPCR证明了检测8个副本/反应的检测极限,对物种特异性试验具有100%的分析特异性.
- qPCR正确识别了单个和混合的Plasmodium物种感染,对混合感染的敏感度高于BS和ICT.
- 在BS阴性患者中,qPCR检测到低水平的寄生性血病,并在治疗后监测寄生虫负载的减少.
结论:
- 开发的Plasmodium qPCR测定提供了出色的物种特异性和快速检测能力.
- 这些qPCR测试对于诊断P.falciparum疟疾,低寄生虫性感染和混合的Plasmodium物种非常有价值.
- 该分子工具增强了进口疟疾的诊断,特别是在资源有限的环境中或复杂的病例中.
