一种基于酵母的测试,用于使用光生物传感器的l-乳酸盐运输抑制剂
Finn Tiedjens1, Maike Menzel1, Pauline Stahnke1
1Department of Pharmaceutical and Medicinal Chemistry, Christian-Albrechts-University of Kiel, Gutenbergstr. 76, 24118, Kiel, Germany.
ChemMedChem
|December 13, 2024
概括
使用光生物传感器的基于酵母的新测定方法显著提高了检测乳酸运输抑制剂 (MCT1和PfFNT) 的灵敏度. 这一进步有助于开发新的抗瘤和抗疟疾疗法.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分子生物学分子生物学
- 寄生虫学的寄生虫学
背景情况:
- 乳酸运输抑制剂正在研究抗瘤和抗疟疾疗法.
- 之前使用放射性标记乳酸盐的测定具有敏感性限制 (IC50 ~ 100 nM) 由于高细胞要求.
研究的目的:
- 开发一种灵敏,高通量检测法,用于评估乳酸转运体的抑制剂.
- 重新评估现有的抑制剂,以提高检测灵敏度.
主要方法:
- 在使用光iLACCO生物传感器的酵母中开发一种无背景,高通量测定.
- iLACCO与人类单碳酸盐载体1 (MCT1) 和Plasmodium falciparum核酸载体 (PfFNT) 的同时表达.
- 在细胞悬浮和单个细胞中对L-乳酸盐吸收的光反应的监测.
主要成果:
- 在iLACCO试验中,通过使用特定的MCT1和PfFNT抑制剂,证明了剂量依赖的信号降低.
- 对36种PfFNT抑制剂的重新评估产生了100nM以下的IC50值,与孤立的传送器亲缘关系数据保持一致.
- 与以前的放射性标记方法相比,该试验获得了显著更高的灵敏度.
结论:
- 基于酵母的iLACCO生物传感器试验为乳酸转运抑制剂的高通量查提供了一个灵敏而强大的平台.
- 这种改进的测定方法有助于发现和开发针对癌症和疟疾的新型治疗剂.
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