通过在体内菌体显示,通过下一代测序来利用特定细胞类型的细胞透的识别

科学领域:

• 血管生物学和医学 血管生物学和医学
• 分子治疗学分子治疗学
• 生物信息学和基因组学

背景情况:

• 血管异常 (VA),特别是静脉形 (VMs),往往源于受激活突变驱动的失调生长,这些突变源于信号通路的激活,如angiopoietin/TIE2-PI3K/AKT/mTOR.
• TIE2 L914F突变是VM中常见的驱动因素,具有治疗目标.
• 目前对VM的全身治疗缺乏病变特异性,突出显示了针对性传递策略的需要.

研究的目的:

• 在VM中发现新型,可选择性地与TIE2 L914F突变病变结合.
• 开发能够向受影响的内皮细胞 (ECs) 传递治疗载荷的细胞透 (CPPs),例如siRNA.
• 通过利用病变特异性结剂,为VMs建立一个有针对性的治疗方法.

主要方法:

• 在活体菌体显示中,使用鼠标异种移植模型对具有TIE2 L914F过度表达ECs的VM进行了采用.
• 亚细胞分离和下一代测序 (NGS) 用于识别和分析病向菌体和潜在的CPPs.
• 层次聚类算法完善了候选CPP的识别,随后在TIE2 L914F表达的人类脉内皮细胞 (HUVECs) 中进行验证,以吸收和siRNA递送.

主要成果:

• 确定了一组具有选择性结合TIE2 L914F病变的细胞透 (CPPs) 的新型组.
• 对NGS数据的生物信息分析,结合层次聚类,使得能够选择高亲和度的CPP候选人.
• 选择的CPPs在TIE2 L914F突变的HUVEC中显示出成功的细胞吸收,并促进了siRNA输送,证实了它们的治疗潜力.

结论:

• 该研究成功地确定了针对VMs的TIE2 L914F突变的新型,病变选择性CPP.
• 开发的NGS和生物信息学方法为发现向治疗提供了一个强大的平台.
• 这些CPP代表了开发针对静脉形的向siRNA输送系统的有希望的候选人.