建立和应用一种基于螺旋环介导同热放大 (HAMP) 的制品中Clostridium perfringens的快速视觉检测方法
Yuheng Yang1,2, Long Du1,2, Congcong Li1,2
1Jiangsu Key Laboratory for Food Quality and Safety-State Key Laboratory Cultivation Base, Ministry of Science and Technology, Nanjing, China.
Journal of food science
|December 14, 2024
概括
一种新的螺旋环介导的同热放大 (HAMP) 方法可以快速检测中的Clostridium perfringens. 这种视觉技术为现场食品安全测试提供了更快,更灵敏的替代方案.
科学领域:
- 食品微生物学 食品微生物学
- 分子诊断学 分子诊断
- 同热放大技术的技术
背景情况:
- 杆菌 (Clostridium perfringens) 是家禽中主要的食源性病原体.
- 快速检测C. perfringens对于食品安全和预防疫情至关重要.
- 目前的检测方法可能耗时,限制了现场应用.
研究的目的:
- 开发和验证一种快速,可视和现场检测方法,用于产品中的C. perfringens.
- 优化螺旋环介导同热放大 (HAMP) 技术用于C. perfringens检测.
- 评估HAMP方法的特异性,敏感性和实际适用性.
主要方法:
- 螺旋环介导同热放大 (HAMP) 反应参数 (温度,时间,试剂) 的优化.
- 对18种常见的食源性病原体进行特异性测试.
- 使用不同度的C. perfringens DNA和样中的细菌负载进行敏感性评估.
- 与终点PCR和实时定量PCR (qPCR) 的比较.
- 使用商用准备食用的肉产品进行验证.
主要成果:
- HAMP表现出高特异性,使C. perfringens与其他病原体区分开来.
- 与PCR和qPCR相比,HAMP表现出更高的灵敏度 (78 fg/μL).
- 非缩样本的检测极限为6.8 × 10^2 CFU/g,随着缩而改善.
- HAMP的检测极限分别低于终点PCR和qPCR的2个和1个数量级.
- 使用HAMP的现场测试结果与传统培养方法相关.
结论:
- 开发的HAMP方法提供了一个快速,准确和可视的手段来检测中的C. perfringens.
- 由于其速度和灵敏度,HAMP非常适合在现场进行食品安全测试.
- 这项研究标志着HAMP方法在C. perfringens检测中的首次应用.
