基于微流体的自动免疫光染色用于单分子局部化显微镜
Jun Dong1, Weibing Kuang2, Bing Shi1,3
1State Key Laboratory of Digital Medical Engineering, School of Biomedical Engineering, Hainan University, Sanya 572025, China.
Biomedical optics express
|December 16, 2024
概括
我们开发了一种低成本的自动化免疫光染色方法,使用微流体学 (SRIF-流体学) 进行单分子定位显微镜 (SMLM). 这种技术显著减少了样本准备时间和抗体使用,使高通量细胞成像成为可能.
科学领域:
- 细胞成像 细胞成像
- 显微镜技术 显微镜技术
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 单分子局部化显微镜 (SMLM) 需要完全自动化高通量细胞成像.
- 目前的SMLM自动化受到免疫光 (IF) 染色的复杂实验操作的限制.
研究的目的:
- 介绍一种低成本的,自动化的IF染色方法,以补充SMLM自动化.
- 为了使SMLM的有效和一致的样本准备.
主要方法:
- 通过微流体 (SRIF-流体) 开发了超分辨率的免疫光染色.
- 将SRIF流体应用于附着和悬浮细胞,用于单色和多色IF染色.
- 将SRIF流体与手动IF染色协议进行比较.
主要成果:
- SRIF-流体药物减少了抗体消耗大约75%.
- 样品准备时间从5.6小时 (手动) 减少到2.54.4小时.
- 在不影响样本标记质量的情况下,实现了一致的成像结果.
结论:
- SRIF-fluidics为SMLM中的IF染色提供了一个高效的,自动化的解决方案.
- 这种方法通过解决样本准备中的瓶来促进高通量SMLM.
- SRIF-fluidics是推进自动化SMLM应用程序的宝贵工具.
