NS2B-D55E和NS2B-E65D变异在化型模型中对日本脑炎病毒基因型I和III之间的NS2B-NS3蛋白酶活动的差异负责
Abdul Wahaab1,2, Yan Zhang1, Ke Liu1
1Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China.
International journal of molecular sciences
|December 17, 2024
概括
日本脑炎病毒 (JEV) 的NS2B-NS3蛋白酶活性在基因型之间有所不同. 在NS2B辅因子的特定变异,特别是在55和65的残留物,显著影响蛋白酶功能和JEV复制.
科学领域:
- 病毒学 病毒学
- 分子生物学分子生物学
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 日本脑炎病毒 (JEV) 依赖NS2B-NS3血清蛋白酶复合体进行复制.
- NS2B辅因子和NS3蛋白酶域 (NS3(pro)) 形成一个活性酶,NS2B的水友性域 (NS2B(H)) 对于相互作用至关重要.
研究的目的:
- 为了比较来自基因型I (GI) 和基因型III (GIII) 的JEV NS2B-NS3蛋白酶的酶活性.
- 研究NS2B辅因子中特定氨基酸变异在确定JEV基因型之间的蛋白酶活性差异中的作用.
主要方法:
- 来自E. coli中的JEV GI和GIII的复合NS2B(H) -NS3(pro) 蛋白酶的制备.
- 使用原基的酶活性测定.
- 通过域交换和特定残留物替代 (NS2B-55,NS2B-65) 来生成和分析位点定向突变物.
主要成果:
- 两种GI和GIIINS2B (H) -NS3 (pro) 蛋白质酶都有相同的切割连接.
- GIII NS2B(H) -NS3(pro) 的蛋白质分解活性明显高于GI.
- 在NS2B(H) 域的变化,特别是在55和65的残留物中,被确定为GI和GIII之间的差异性蛋白酶活动的关键决定因素.
结论:
- 该NS2B辅因子在NS3(pro) 蛋白酶活性中起着关键的调节作用.
- 在NS2B水友性域中,特定的氨基酸变异 (NS2B-55和NS2B-65) 对JEVGI和GIII蛋白酶之间的功能差异作出了重大贡献.
- 了解这些变异对于理解JEV GI和GIII病毒复制动态至关重要.
